青青久久精品国产免费看,大伊香蕉精品视频在线不卡,日本韩国精品一区二区三区,国产丝袜按摩女技师在线

當前位置:
首頁 > 技術文章 > 樣品濃縮技術
目錄導航 Directory
技術支持Article
樣品濃縮技術
點擊次數:2038 更新時間:2011-07-11

酶聯免疫技術中,有時需要將樣品液(如抗原、抗體、酶、酶標抗體或酶標抗原)濃縮。

常用的濃縮技術如下:

1.反透析法

如果在裝有樣品液的透析袋周圍放上濃度很高的且具有吸水作用的多聚物或蔗糖,由于膜內滲透壓比膜外低,膜內樣品液中的蛋白質進行濃縮。常用的多聚物有聚乙烯吡咯酮(Polyvinylpyrrolidone,簡稱PVP,分子量約12000)、聚乙二醇(Polyethylene glycol,簡稱PEG,亦稱Carbowax,分子量約6000,但PEG的分子量在500010000均可用),吸水劑不一定用干劑,可用30%的濃溶液,吸水更快。PEG濃溶液中常加入堿液以中和酸性。吸水劑用后可通過加溫或吹風進行回收。PVPPEG濃縮效果好,但是,小分子量聚合體易進入膜內,并且PVP對在280nm波長處的紫外光有吸收作用。由于蔗糖易進入膜內,因此,要求蔗糖必須高純度,并且對下一步工作(例如免疫動物)無影響。蔗糖的優點是來源方便,但會因分子量小而影響濃縮效果。

   2.凝膠吸水法

   凝膠例如葡聚糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠是具有一定孔徑的微孔和吸水性能的多聚物顆粒,在蛋白樣品液中加入孔徑較小的凝膠顆粒,能吸去樣品中的水分,達到濃縮的目的。一般用Sephadex G25 G50,濃縮效果好,吸附作用也小,經過離心去吸水凝膠即得蛋白濃縮液。

3.蒸發去水法

將樣品液裝在透析袋內,懸掛起來,在低溫下用電扇吹風蒸發,或將樣品液倒在平面搪瓷淺盆中,用電扇吹風蒸發,均可達到濃縮目的。此方法簡便,但是所需時間較長,并會增高樣品中的鹽濃度。因此,在濃縮前或濃縮過程中應對揮發性緩沖液進行透析,然后再用蒸發去水法濃縮。

4.冰凍法

樣品液在冰凍時,水分子結成冰,鹽類及蛋白分子不進入冰內而留在液相中。操作時先將樣品液冷卻成固態,然后緩緩融解,利用溶劑與溶質融解點的差別而達到除去大部分溶劑的目的。例如,酶的濃縮,通過冰凍形成不含酶的純冰結晶浮于液面,酶集中于下層溶液中,移去上層冰塊,即得酶的濃縮液。

5.超濾濃縮法

在濃縮樣品時,超濾法的作用也很大,它可以在34h內,將500ml很稀的樣品液濃縮300倍以上,而不使蛋白變性,回收率高達90%以上。

超濾濃縮法是借助一種特殊的薄膜,對樣品液中各種溶質分子進行選擇性過濾的方法。當樣品液在一定的壓力通過特殊薄膜時,溶劑和小分子通過,大分子因受薄膜阻留而留在原樣品液中,這是一項新興的濃縮、去鹽和生物大分子分離純化的技術。(上海豐翔

 

滬公網安備 31011802001678號

国产精品15p| 久久久久88色偷偷免费| 91 pron在线播放| 欧美精品久久男人的天堂| 韩日 变态 高跟 一区| 一级α做片免费观看久久| 国产精品日本女优在线观看| 郭盈恩全部视频在线观看| 国产欧美久久久精品视频| 精品国产呦系列在线观看| 黑大吊大战亚洲女嗷呜叫| 欧美日韩精品一区人成线在 | 亚洲天堂网手机av在线| 亚洲欧洲日产国码高潮AV| 欧美日韩无中文在线视频| eeuss影院www在线观看| 亚洲成人一级片| 欧日韩高清a∨在线播放| 亚洲精品揄拍自拍第一页| 欧美日本日韩一区二区三区| 国产亚洲精品精品国产亚洲综合| 国产亚洲一区二区三区乱码| 一区二区三区四区不人妻| 国产精品永久免费| 久久99精品久久久久久野外 | 日韩欧美精品视频一区二区| 国产精品无码电影在线观看| 午夜免费福利小电影| 国产精品va在线观看无码| 国产精品久久久久久久久久免费| 欧美一区二区三区在线播| 国产精品亚洲va在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人精品| 久久精品久久久国产区蓝牛| 亚洲人禽杂交AV片久久| 我要吃骚穴视频无码在线| 六十路の高齢熟女が中文在线播放 | 欧美日精品一区二区三区| 真实女生在线被c网站上| 巴巴在线电影| sci一区二区三区四区|